Procedimientos y Técnicas empleadas en el DGP

1- Biopsia de blastomeras.

Después de un proceso de Fecundación in Vitro y mediante técnicas de micromanipulación se extraen 1 o 2 blastómeras del embrión que normalmente se encuentra en un estadio de 6-8 células.

La biopsia embrionaria se realiza en un microscopio invertido dotado de un sistema de micromanipulación parecido al utilizado para la técnica de la ICSI. Con una pipeta Holding se sujeta al embrión y con una pipeta de aspirado se realiza un agujero en la zona pelúcida procediéndose inmediatamente al aspirado de 1 o 2 blastómeras sobre las que se realizarán los análisis adecuados. La eliminación de estas células del embrión no influye en su viabilidad y capacidad de supervivencia, ya que las células restantes son todavía totipotentes y capaces de formar un individuo completo y perfectamente normal.

2- Estudios genéticos.

Estas blastómeras extraídas serán sometidas a una serie de estudios para determinar la existencia de alteraciones cromosómicas y/o presencia de determinadas enfermedades genéticas:

A) Estudio de Aneuploidias si la enfermedad que queremos localizar es debida a una anomalía numérica o estructural de los cromosomas. Para ello se emplea la técnica de la FISH (Hibridación in situ Fluorescente).

Esta técnica permite teñir el área centromérica o regiones específicas de diferentes cromosomas con diversos fluorocromos coloreados. Se esta utilizando en la actualidad para identificar simultáneamente los cromosomas 13, 18, 21 y los cromosomas sexuales X e Y. El estudio de aneuploidias está indicado principalmente en:

• Mujeres de edad avanzada.
• Mujeres abortadoras de repetición.
• Presencia de factor masculino severo.
• En fallos repetidos de implantación en FIV.

Análisis disponibles:

• Determinaciones del sexo X,Y,18, para enfermedades ligadas al sexo.
• Aneuploidias :

  1) test de 5 cromosomas X,Y, 13,18,21 , para pacientes de edad avanzada

  2) test de 7 cromosomas X,Y,13,16,18,21,22, fallos de implantación.

  3) test de 9 cromosomas X,Y,13,15,16,17,18,21,22 , abortos de repetición.

• Translocaciones Robertsonianas.
• Translocaciones recíprocas y otras reorganizaciones cromosómicas.

Una de las principales indicaciones de todas estas técnicas de la biología molecular dentro de la Fecundación in Vitro es la determinación del sexo de los embriones. En la actualidad una combinación de las técnicas de PCR Y FISH nos da una fiabilidad de prácticamente el 99 % en la determinación del sexo de los embriones preimplantatorios. En España solo es posible elegir el sexo con estas técnicas cuando haya una muy alta probabilidad de transmisión de una enfermedad genética grave ligada al sexo.

B) Estudio de Enfermedades Monogenéticas si la enfermedad que queremos localizar es debida a una o varias mutaciones y queremos saber si el embrión es portador de algunas de ellas se emplea la técnica de la PCR (Reacción en cadena de la Polimerasa) que nos va a permitir amplificar el ADN del embrión y detectar en su genoma la presencia o no de la mutación génica que estamos investigando.